Natriumcitratpuffer wird für die RNA-Isolierung verwendet, da er die Basenhydrolyse der RNA-Stränge minimiert. Dies macht es zu einem wichtigen Schritt in der mRNA-Reinigung während der Genomforschung oder zum Studium der Transkription.
Auf Citrat basierende Puffer können auch den Nachweis von Antigenen in fixierten Gewebepräparaten unterstützen, da sie die Vernetzungen zwischen den Antigenen und den Fixiermedien aufbrechen.
Machen Sie mit der untenstehenden Anleitung einen Natriumcitrat-Puffer von pH 6. Die Anweisungen sind nicht nur einfach, sondern auch schnell auszuführen. Es dauert nur etwa 10 Minuten, um diese Schritte auszuführen.
Zwei Optionen, um den Puffer zu machen
Es gibt zwei Möglichkeiten, einen Natriumcitratpuffer herzustellen. Stellen Sie zuerst fest, ob Sie sowohl Zitronensäure als auch die konjugierte Base Natriumcitrat zur Verfügung haben. Wenn Sie nur Zitronensäure haben, ist das kein Problem. Sie können den Puffer noch erstellen.
Auf der anderen Seite, wenn Sie sowohl die Säure als auch die Base haben, erstellen Sie eine Stammlösung von jedem. Mische 21 Gramm Zitronensäure in 1 Liter destilliertem Wasser und 29,4 Gramm Natriumcitrat in 1 Liter destilliertem Wasser.
Wenn Sie nur Zitronensäure haben, mischen Sie 2,1 Gramm in knapp 1 Liter destilliertem Wasser und fahren Sie mit dem nächsten Schritt fort.
Mischen von Zitronensäure und Natriumcitrat-Lösungen
Jetzt, wo Sie Ihre Stammlösung erstellt haben (wenn Sie sowohl eine Säure als auch eine Base hatten) oder Ihre Säure in destilliertem Wasser mischen (wenn Sie dies nicht getan haben), können Sie sich auf Ihre Lösungen konzentrieren.
Mischen Sie 82 Milliliter der Zitronensäurelösung mit 18 Milliliter der Natriumcitratlösung.
Dann das Gesamtvolumen der Mischung mit destilliertem Wasser auf knapp 1 Liter auffüllen. Lassen Sie genügend Volumen, um die Zugabe von Natriumhydroxid (NaOH) im nächsten Schritt zu ermöglichen.
Einstellen des pH-Wertes
Unter leichtem Rühren der Lösung mit einem Magnetrührer wird mit 1 M Natriumhydroxid der pH-Wert der Mischung auf 6,0 eingestellt. Danach wird das Endvolumen der Lösung mit destilliertem Wasser auf 1 Liter aufgefüllt, wobei ein Messkolben verwendet wird.
Was Sie zum Puffer machen müssen
Nicht nur, dass Sie nicht lange brauchen, um den Natriumcitratpuffer herzustellen, Sie werden auch nicht viele Materialien dafür brauchen. Mit Zitronensäure, 1M Natriumhydroxid, destilliertem Wasser und einer kalibrierten pH-Sonde sind Sie auf halbem Weg. Die Verwendung von Natriumcitrat ist optional.
Die Herstellung des Puffers erfordert auch einen 1-Liter-Messzylinder, einen 1-Liter-Messkolben und drei 1-Liter-Medienflaschen. Schließlich benötigen Sie einen Magnetrührstab und einen Magnetrührer.
Wenn Sie nicht über alle diese Materialien verfügen, sollten Sie das Labor in Ihrer Schule oder an Ihrem Arbeitsplatz verwenden, damit Sie es nicht selbst kaufen müssen. Sie können diese Materialien auch einfach online kaufen oder einen Fachgeschäft in Ihrer Nähe besuchen.